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【评测原理】-飞凡测试
斑马鱼作为理想的人类造血毒性模型,是基于其造血系统与人类造血系统高度保守的进化保守前提。 斑马鱼通过与人类造血相似的信号通路,形成了主要包括红系、髓系、淋巴系和巨核系统的造血系统。 斑马鱼可以建立多种血液学毒性模型荧光斑马鱼,主要包括红细胞毒性、白细胞毒性和凝血病毒性三类。 因此,它们主要与斑马鱼中性粒细胞、巨噬细胞、红细胞和血流有关。 斑马鱼体型小、实验周期短,可作为评价血液毒性的便捷模型。
转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼中性粒细胞自身发出荧光,在荧光显微镜下可直接观察中性粒细胞的数量; 黑色素等位基因突变斑马鱼完全透明,巨噬细胞染色后可直接观察。 显微镜下观察巨噬细胞数量; 用邻联茴香胺对斑马鱼心脏红细胞进行染色,在显微镜下可直接观察红细胞数量(信号强度)。
【实验计划】-飞凡测试
我们将测试的斑马鱼分为两组,即正常对照组和测试产品组(测试产品通过溶解到鱼类养殖水中被斑马鱼摄入)。
处理后,(1)通过荧光显微镜观察并计数斑马鱼中性粒细胞的数量; (2)通过斑马鱼巨噬细胞染色观察巨噬细胞数量; (3)邻联茴香胺对心脏红细胞进行染色,显微镜下观察心脏红细胞染色强度。
【结果展示】-飞凡测试
图1. 斑马鱼中性粒细胞表型图
(绿点是中性粒细胞)
可见,试验组中性粒细胞数量较正常对照组明显减少。
图2. 斑马鱼巨噬细胞表型图
(红点是巨噬细胞)
可以看出,试验组巨噬细胞数量较正常对照组明显减少。
图3 斑马鱼红细胞抑制表型图
(蓝色虚线框为分析区域,分析红细胞染色强度)
可见,试验组心脏红细胞染色强度明显低于正常对照组。
【评测结论】-飞凡测试
1、经过每组30只斑马鱼的对比实验,测试组的中性粒细胞和巨噬细胞数量明显减少,红细胞染色强度明显降低。
2.本实验证实受试品具有血液毒性。
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