黄颡鱼及斑点叉尾鮰杀鲑气单胞菌病

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几乎每年初夏之交，养殖动物，尤其是需要越冬生长的动物，都需要渡过同样的劫难。

COVID-19疫情即将结束，但鱼灾仍在继续爆发。 自2019年春季长江中下游等全国主要草鱼养殖区出现爆炸性死亡现象以来，几乎每年初夏之际，水产养殖动物，尤其是需要草鱼养殖的动物，都会受到严重影响。越冬生长，也得渡过同样的灾难，比如斑点叉尾鮰、黄颡鱼。 等，多种鱼类主要养殖区出现大面积死亡，甚至池塘空空。 本文将本实验室研究的黄颡鱼和斑点叉尾鮰的病害分享给大家，供参考和交流。

斑点叉尾鮰的杀鲑气单胞菌病

2016年2月，湖南常德地区网箱养殖的斑点叉尾鮰出现持续性疾病，主要表现为体表溃烂。 发病水温为12-15℃。 后期死亡率呈爆发性上升趋势。 由于该病体型较大，集中在1公斤及以上，总死亡率达到50%左右，给农民造成很大的经济损失。 在这项研究中，从患有溃疡的斑点叉尾鮰中分离出致病菌株ry01。 生理生化鉴定和16S rDNA基因序列分析表明，ry01菌株为沙门氏菌无色亚种。 （亚种）。 人工感染该细菌后，病鱼表现出与自然患病相似的症状，从组织中重新分离出的细菌特征与原始感染细菌相同。 该菌株腹腔注射后对斑点叉尾鮰的半数致死量为4.17×10 6 CFU/mL。 菌株ry01对强力霉素和左氧氟沙星高度敏感，为斑点叉尾鮰疾病的防治提供理论依据。 具体参考杨一斌，徐宁，董静，等。 香蒲无色杀鲑气单胞菌亚种的分离鉴定及药敏特性[J]. 水生生物学报, 2017, 41(04):787 -792. 近年来，该病在大水面网箱养殖斑点叉尾鮰中频繁出现，值得进一步关注。

斑点叉尾鮰气单胞菌病

2015年10月，临床诊断出湖南常德爆发网箱香蒲病。 架设网箱的水域生活垃圾较多，水质发黑，氨氮较高。 斑蒲发病率和死亡率较高，发病率和死亡率主要集中在经济鱼类。 其自然症状包括体表和腹部出现明显出血点、肛门红肿、大量血液流出。 尸检发现，他的肝、脾呈黑色，肾脏严重充血，心脏增大，腹腔内有大量血液。 从湖南常德某养殖场死香蒲的肝、肾、腹水和血液中分离到致病菌株zy02。 观察细菌的形态特征，测定理化性质，并采用分子生物学方法对细菌进行鉴定。 PCR同时扩增16S rDNA和gyrB基因，分析16S rDNA和gyrB基因序列的同源性，构建基因序列。 系统发育树。 根据生理生化测定以及16S rDNA和gyrB基因序列分析，zy02菌株为中间气单胞菌。 人工感染该细菌后，病鱼表现出与自然患病相似的症状，从组织中重新分离出的细菌特征与原始感染细菌相同。 腹腔注射后，该菌株对香蒲的半致死浓度为3.89×/mL。 zy02菌株对多西环素、庆大霉素和左氧氟沙星高度敏感； 对红霉素中度敏感； 对阿莫西林、磺胺异恶唑、克林霉素、利福平五种药物耐药。 本研究为香蒲病害的防治提供理论依据。 参考杨一斌，杨秋红，徐宁，等． 斑点叉尾鮰中间气单胞菌(培养基)的分离鉴定及药敏特性[J]. 海洋与湖泊学, 2016, 47(06): 1199-1204.

2015年9月，湖北省仙桃市一养殖场发生斑点叉尾鮰大规模死亡事件。 斑点叉尾鮰的死亡呈爆炸性，发病快、死亡快，死亡率高达20%左右。 主要症状包括眼球突出、胸鳍、腹鳍和头部出血以及粘液增多。 尸检时发现，肾脏充血呈黑色，肝脏呈土灰色，脾脏呈黑色，腹腔内有大量血水积聚，肠道红肿，不食。 。 从患病斑点叉尾鮰的血液、腹水及重要组织器官中分离纯化病原菌，并对分离株进行理化性质测定、gyrB序列分析和回归感染实验，并进行药物采用KB法分析分离菌株的敏感性。 结果显示，再次感染的实验鱼表现出与自然疾病相似的症状，并且重新分离细菌后得到了相同的分离株，表明该分离株是引起当前斑点叉尾鮰病的病原体。 该菌株的理化性质与普通气单胞菌基本一致。 经gyrB基因序列分析，该分离株与苏打气单胞菌100%同源，初步鉴定该分离株为 。 分离株对多西环素和头孢噻肟高度敏感，对氟苯尼考、阿奇霉素和左氧氟沙星中度敏感。 分离出的菌株是斑点叉尾鮰的病原体，紧急情况下可使用强力霉素等药物进行防治。 参考杨宜斌，徐宁，董静等。 斑点叉尾鮰病原菌嗜温气单胞菌的分离鉴定及药敏分析[J]. 中国渔业质量与标准，2017，7(04)：45-50。

2022年春夏季，对盐城斑点叉尾鮰大规模死亡原因进行了现场调查，对盐城斑点叉尾鮰养殖集中的射阳、大丰、东台3个县区进行了调查。 收集了7个样本，总共28只受影响的动物。 斑点叉尾鮰的主要症状是体表溃疡、发红并有出血点、肛门红肿、肠道发炎、脾脏发黑等。 经细菌分离纯化，获得29株分离菌株； 经16S rRNA鉴定，21株分离株为白癜风气单胞菌，其余为孢子、希瓦氏菌等。

斑点叉尾鮰病毒性出血病

2016年10月中旬至11月底，湖北仙桃市一大型养殖场饲养的斑点叉尾鮰成批死亡。 大量使用调水药物和碘制剂消毒，未能有效控制病情进展。 死亡事件相隔数天，累计死亡人数近500公斤。 ，造成更大的经济损失。 一条患病且濒临死亡的斑点叉尾鮰被带去进行临床诊断。 发现斑点叉尾鮰的鳍条基部严重充血，眼球轻微突出，腹部轻微肿胀。 体表无其他明显症状，鳃部稍充血、肿胀。 尸检显示，患病斑点叉尾鮰体腔内有黄色液体，肝脏呈灰黄色，脾肾呈黑色，肠道呈白色，无炎症，肠内无食物。 取体表粘液和各种组织切片，在光学显微镜下观察，没有发现寄生虫或其他病原体。 冷冻的疾病样本被带回实验室进行进一步分析，以寻找可能的病原体。 通过实验和文献比对，基本确定本次斑点叉尾鮰事件是由病毒引起的。 参考杨宜斌，宋毅，艾晓辉。 斑点叉尾鮰暴发性出血病的防治[J]. 渔业致富指南，2017年，第474（18）期：58-59。

斑点叉尾鮰中的鲁氏耶尔森氏菌

2016年1月至2月，湖南安化网箱养殖斑点叉尾鮰出现大面积持续死亡事件。 该病发病迅速，死亡率高，发病水温在5～15℃之间。 经调查，斑点叉尾鮰养殖区养殖水体未受到大范围污染，养殖水体质量符合渔业水质标准。 通过对病死斑点叉尾鮰的临床诊断发现，该病的典型症状是发病初期运动迟缓、体质瘦弱； 胸鳍、头部体表有明显出血症状； 并在解剖时发现组织器官的不同病变和病变。 充血，特别是肾、脾充血严重，腹腔内有大量腹水； 肠道内有粘液，肠壁薄而发红，并有出血症状。 显微镜检查未发现寄生虫或其他感染。 。 本研究从病鱼和垂死鱼的肝、脾、肾中分离得到一株病原菌，并对其进行常规理化性质、分子生物学、人工感染实验和药敏试验。 结果表明，分离菌株理化特性与鲁氏耶尔森氏菌特征一致，与NCBI登记的鲁氏耶尔森氏菌16S rDNA基因同源性达到99%以上。 在系统发育树上，它与鲁氏耶尔森氏菌同一科。 人工感染的鱼表现出与自然感染的鱼相似的症状，并且可以从病鱼的组织中再次分离出相同的病原菌，这表明鲁氏耶尔森氏菌是斑点叉尾鮰疾病的病原体。 分离菌株对氟苯尼考、多西环素、新霉素等药物高度敏感。 该研究为斑点叉尾鮰暴发性出血病的防治提供理论依据。 参考杨一斌，刘天强，杨涛等。 冬季斑点叉尾鮰大量死亡病原的分离与鉴定[J]. 中国渔业质量与标准，2016，6(06)：53-58。

斑点叉尾鮰普通变形菌的来源

黄颡鱼和斑点叉尾鮰的链球菌病

2016年7月至8月，福建漳州一黄颡鱼养殖场出现大量黄颡鱼死亡。 发病率为40%～60%，病鱼死亡率接近90%。 两侧及鳍条基部有出血症状，肛门红肿，有红色液体流出； 尸检显示肝脏、肾脏、脾脏等肿胀充血，部分病鱼出现腹水。 从病黄颡鱼的肝脏、肾脏和脾脏中分离纯化出病原菌，并通过化学表征和16S rRNA序列分析进行鉴定。 进行人工感染试验，并采用纸片扩散法分析药敏特征。 结果表明，分离菌株s​​i222对黄颡鱼的LD50为2.63×10⁴cfu·g-1。 其理化性质与海豚链球菌（iniae）基本一致。 16S rRNA序列与海豚链球菌100%同源。 综合分离菌株确定为海豚链球菌。 si222菌株对苯唑西林、头孢拉定、克林霉素、氯霉素、利福平等11种抗生素高度敏感； 它对青霉素、阿莫西林、磺胺异恶唑、氟苯尼考等6种抗生素具有耐药性。 参考杨一斌，徐宁，杨秋红，等． 黄颡鱼海豚链球菌的分离鉴定及药敏特性[J]. 浙江农业科学, 2017, 29(06): 903-909. 斑点叉尾鮰和海豚的链球菌性咽喉炎症状与黄鲶鱼相似。

黄颡鱼溶血性腹水病

2017年6月至7月，湖北荆州某养鱼场暴发大面积腹水病，发病率约50%，死亡率较高，造成重大经济损失。 从垂死的黄鲶鱼的腹液中分离出菌株 HS01。 对分离物的理化性质和DNA序列进行了检测。 根据理化性质、16S rRNA和gyrB基因序列比对，分离株HS01为嗜水气单胞菌。 人工感染该细菌后，病鱼表现出与自然患病相似的症状，且毒力较强。 黄颡鱼半致死剂量为2.51×105 CFU·g -1 ，从病斑中分离到与感染菌一致的菌株。 因此，嗜水气单胞菌被确定为黄颡鱼溶血性腹水病的病原体。 该菌株对头孢唑肟、头孢噻肟、奈替米星、氟苯尼考等10种抗生素高度敏感； 对头孢拉定、链霉素、新霉素、卡那霉素等6种抗生素中度敏感； 对四种抗生素耐药：阿莫西林、青霉素、妥布霉素和红霉素。 本研究为黄颡鱼溶血性腹水病的防治提供理论依据。

腹水是水产动物养殖过程中常见的危害性疾病。 主要症状是腹胀。 根据体表是否有出血、肛门是否红肿分为溶血性腹水和非溶血性腹水。 溶血性腹水病是由细菌病原体引起的，而非溶血性腹水病多是由于营养和代谢紊乱引起的。 据报道出现腹水的物种包括异种银鲫鱼[25]、中华鳖[26]、鲢鳙[27]、黑鱼[28]、日本鳗鱼[29]和牛蛙[27]。 30]等，大部分为溶血性腹水。 由于腹水早期症状不明显，一旦腹水积累到一定量，腹部变大，治疗起来很困难，因此在养殖生产过程中往往会造成重大的经济损失。

此次黄颡鱼爆发严重疾病，导致大量死亡。 主要症状为腹胀、肛门红肿、溃烂。 尸检发现，黄颡鱼腹腔内有大量腹水，腹水与尸体分离后几分钟内就形成胶状状态。 淤血肿胀，肝黄，肠内无食。 与以往研究的症状比较[25]表明，这种黄颡鱼病是一种典型的溶血性腹水病。 参考杨宜斌，艾晓辉，宋毅等。 黄颡鱼溶血性腹水病的初步研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(08): 1239-1248 杨宜斌. 黄颡鱼三大事件的防治思考[J]. 渔业致富指南，2022年，第578（02）期：60-61。

黄颡鱼体表溃疡病

2018年9月至10月，浙江湖州某养殖场的黄颡鱼出现体表溃疡。 发病率很高，养殖的黄颡鱼外观较差，价格低廉，给养殖户造成重大经济损失。 本实验从患病黄颡鱼病灶中分离纯化病原菌，通过ITS序列分析进行鉴定，进行人工感染试验，并采用纸片扩散法进行药物筛选。 结果表明，分离菌株为本次引起黄颡鱼病的病原菌，该菌株的ITS序列与不规则毛霉（Mucor）同源性最高。 参考杨宜斌，蒋兰，宋毅，等。 黄颡鱼体表溃疡病的初步研究[J]. 淡水渔业, 2019, 49(05): 51-55.DOI: 10.13721/ki.dsyy.2019.05.008 杨一斌. 黄颡鱼三大病害防治的思考[J]. 《渔业致富指南》，2022年，第578（02）期：60-61。

更多案例请参考杨宜斌。 黄颡鱼急性肠炎的诊治及防治一例[J]. 渔业致富指南，2022年，第586(10)期：67-68。 等人。

防控思路

目前，鱼类的微生物病原体主要有细菌、真菌和病毒。 常见的分离鉴定方法主要是培养法，即选择合适的培养基对目标生物进行培养、纯化，然后进行相关的鉴定工作。 最重要的是微生物的培养。 病原微生物分离纯化技术的发展，给鱼类病原微生物的鉴定带来了极大的便利，推动了鱼类病原学的革命性发展。 随着研究的深入和新技术的发展，我们认识到并不是所有的病原微生物都可以培养。 随着养殖环境的恶化，鱼类病原体变得更加多样化，一些无法培养（或常规条件下难以培养）的细菌和真菌也可能成为鱼类病原体。 因此，迫切需要创新病原分离鉴定技术。

16S rDNA高通量测序技术主要基于细菌16S rDNA基因的高功能保守性和一定程度的高变异性。 它能够真实、全面地反映样品中细菌的群落结构，从而检测可培养和不可培养的细菌。 类型。 随着现代高通量测序技术的发展，16S rDNA高通量测序技术已广泛应用于各个领域分析细菌多样性。 对于水产动物细菌性病原体，利用16S rDNA高通量测序技术，可以解决难以或无法培养的细菌感染引起的病原菌确定问题。 可直接对病害样本进行测序，获得病鱼相应病变部位及相关组织器官的细菌群落。 ，通过高通量获取细菌种类信息，从而对可分离培养的细菌制定有针对性的分离培养措施，也可获取不可培养细菌的一般信息，用于毒力相关研究。 参考杨宜宾。 鱼类细菌性病原体分离鉴定新方法[J]. 科学养鱼，2020年，第375（11）期：46-47。 DOI：10.14184/ki.-843x.2020.11.024。

医生必须首先诊断患者的疾病，然后应用适当的药物。 只有正确的诊断周期才能让患者更快康复。

鱼病的诊断还在于明确疾病类型，掌握发病原因，制定科学的治疗方法，达到标本兼治的目的，消除用头治头痛的尴尬。和一只脚酸痛的脚。

鱼病的诊断是病因，而不仅仅是病原体。 诊断需要遵循一定的方法和程序。 不建议教条地诊断鱼病，也不建议仅检测病原体来诊断疾病。

参考杨宜宾。 鱼病诊断大于等于病原鉴定[J]. 渔业致富指南，2021，No. 565(13): 64-66 杨一斌，艾晓辉，杨贤乐。 从鱼类疫情探讨鱼类病原鉴定的意义[J]． 科学养鱼，2020，第373（09）期：46-47。 DOI：10.14184/ki.-843x.2020.09.023。 进行药敏试验以了解病原体的耐药性。 参考文献[1]杨宜斌，艾晓辉，宋毅． 水产动物病原药敏实验技术[J]. 科学养鱼, 2017, No. 339(11): 63. DOI: 10.14184/ki.-843x .2017.11.035 杨一斌. 水产动物病原体药敏实验分析[J]. 《渔业致富指南》，2021年，第571（19）期：68-72。

预防为主，治疗为主。 加强鱼疫预防，保护肝胆，增强免疫力。 我们并不完全追求高收益。 高收益并不等于高效益。 接种疫苗，添加多糖增强免疫力，保护肠道促进消化，秋季做好能量储备，春冬季天气晴好时适时少量投喂，鱼开始进食时注意循序渐进。 改善环境质量，不能排斥、迷信新技术、新方法。 如果可以的话，我们应该尽力自己做。 解决问题主要靠细心、勤勉、责任，强化管理。

最后，建议提高渔业医生的社会认可度，给予从业人员足够的理解和尊重。 水生动物疫病防治是一门技术性、专业性很强的学科。 是水产行业从业者“事业可持续发展”的最终保障，绝不是服务于营销的手段。 我始终认为，养殖过程中非传染性疾病比传染性疾病多。 然而，原发传染病和继发传染病并没有很好区分。 因此，只要有疾病发生，就认为是传染病，从而走向治疗的方向。 出现了偏差。 因此，应建立鱼病诊断和科学防治的标准化程序（SOP），并尽快让水生动物执业兽医上岗。 要加强培训，更新专业知识，让专业的人做专业的事，减少疾病造成的经济损失。 从而推动乡村振兴工作。 当然，鱼医生始终是养殖业的辅助，重点还是养殖管理，不能本末倒置。

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